Fig. 3. Caratterizzazione del genoma sintetico isolato dal lievito.

(A) cloni di lievito contenente un genoma sintetico completamente assemblato  sono stati esaminati da PCR multiplex con un primer set che produce 11 ampliconi, uno in ciascuna delle 11 montaggio dei raccordi. Lievito clone sMmYCp235 (235) prodotto i 11 prodotti di PCR attesi per una completa assemblaggio del genoma. Per confronto, il genoma naturale estratto dal lievito (WT) è stato anche analizzato. Prodotti di PCR sono stati separati su un 2% E-gel (Invitrogen). L indica il 100-bp ladder (NEB).

(B) Le dimensioni del previsto Asc I e BssH frammenti di restrizione II per naturale (WT) e sintetiche (Syn235) M. mycoides genomi.

(C) Naturale (WT) e sintetici (235) M. mycoides genoma sono stati isolati da lievito in spine agarosio. Inoltre, il DNA è stato purificato da il ceppo ospite da solo (H). tappi di agarosio sono stati digeriti con Asc I o II BssH e frammenti sono stati separati da serrateomogenea campo elettrico (Chef) elettroforesi su gel. Frammenti di restrizione corrispondenti alle dimensioni corrette sono indicato dai numeri frammento mostrato in (b).

(A) cloni di lievito contenente un genoma sintetico completamente assemblato  sono stati esaminati da PCR multiplex con un primer set che produce 11 ampliconi, uno in ciascuna delle 11 montaggio dei raccordi. Lievito clone sMmYCp235 (235) prodotto i 11 prodotti di PCR attesi per una completa assemblaggio del genoma. Per confronto, il genoma naturale estratto dal lievito (WT) è stato anche analizzato. Prodotti di PCR sono stati separati su un 2% E-gel (Invitrogen). L indica il 100-bp ladder (NEB). (B) Le dimensioni del previsto Asc I e BssH frammenti di restrizione II per naturale (WT) e sintetiche (Syn235) M. mycoides genomi. (C) Naturale (WT) e sintetici (235) M. mycoides genoma sono stati isolati da lievito in spine agarosio. Inoltre, il DNA è stato purificato da il ceppo ospite da solo (H). tappi di agarosio sono stati digeriti con Asc I o II BssH e frammenti sono stati separati da serrateomogenea campo elettrico (Chef) elettroforesi su gel. Frammenti di restrizione corrispondenti alle dimensioni corrette sono indicato dai numeri frammento mostrato in (b).